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一、前言
目前，人們對以免疫球蛋白（IgG）為主的抗體藥物的需求日益高漲。在抗體藥物的研發(fā)以及制備工藝建設(shè)中，由于IgG表達需進行篩選，所以必須快速及準(zhǔn)確地定量細胞培養(yǎng)液中的IgG。而且，即使在工業(yè)制備過程中，IgG的定量也是重要的質(zhì)量控制項目之一。為此，日本東曹公司特推出以多孔親水性聚合物為基質(zhì)，表面鍵合有重組Protein A官能團的TSKgel Protein A-5PW親和色譜柱，用于IgG的快速、高分離度分析。
二、特點
1、填料粒徑20μm，機械強度高，可用于IgG的快速分析；
2、柱身為PEEK材質(zhì)，大大減少非特異性吸附；
3、對IgG有很高的動態(tài)吸附載量，定量范圍寬；（IgG濃度：0.1~10g/L）
4、標(biāo)準(zhǔn)流速2.0ml/min條件下2min內(nèi)可完成分析，也能夠在高流速4.0ml/min下進行分析；
5、色譜柱耐用性好，使用壽命長；（取CHO細胞培養(yǎng)液上清液連續(xù)進樣2000次以上色譜柱性能不變）
6、與TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F親和層析介質(zhì)具有相同的官能團，所以也有著相同的分離選擇性，同樣耐堿，有利于生產(chǎn)放大。
三、目標(biāo)分析對象
■ ?IgG??
■ ?Fc融合蛋白
四、用途????
■ ?對CHO細胞培養(yǎng)上清液中的IgG定量
■ ?培養(yǎng)條件的摸索????
■ ?生產(chǎn)工藝的管理
五、產(chǎn)品一覽表
名稱 | TSKgel Protein A-5PW |
貨號 | 023483 |
基質(zhì) | 多孔的親水性聚合物 |
粒徑 | 20μm |
孔徑 | 1000? |
官能團 | 重組Protein A?? Hexamer of C domain |
色譜柱尺寸 | 4.6×35mm |
色譜柱材質(zhì) | PEEK |
六、應(yīng)用實例
1. 多克隆IgG的分離
2. IgG的校準(zhǔn)曲線
3. 流速對分離效果的影響
4. 連續(xù)進樣測試中的色譜圖以及進樣測試前后的IgG校正曲線
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