如何選擇層析填料 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??

●五大類(lèi)層析方法? 1.尺寸排阻（SEC）

????????????????? 2.離子交換（IEX）

????????????????? 3.親和層析（AFC）
????????????????? 4.疏水層析（HIC）

????????????????? 5.反相層析（RPC）

●介質(zhì)—顆粒越細(xì)、大小越均勻，分辨率越高，但反壓亦較高。

●物理穩(wěn)定性—能承受高流速，同時(shí)保持柱床體積和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，省去了每次重新裝柱的流程，提高重復(fù)性。

●化學(xué)穩(wěn)定性—能承受極端pH，高鹽，利于開(kāi)發(fā)分離條件和在線清洗（CIP），大大延長(zhǎng)介質(zhì)壽命和提高重復(fù)性。

若對(duì)目標(biāo)蛋白或者樣品不大了解，可以嘗試以下方法：

●使用分離范圍寬廣的凝膠過(guò)濾介質(zhì)，依據(jù)分子量將樣品分成不同組分。
●用含專(zhuān)一配體或抗體的親和層析介質(zhì)結(jié)合目標(biāo)蛋白，一步即可得到高純度樣品；也可以用各種活化偶聯(lián)介質(zhì)偶聯(lián)目標(biāo)蛋白的底物、受體等自制親和介質(zhì)。
●體積大的樣品，往往使用離子交換層析來(lái)濃縮和粗純化；高鹽洗脫的樣品再用疏水層析純化。

●疏水層析用高鹽吸附、低鹽洗脫的原理，洗脫的樣品又可直接上離子交換介質(zhì)；兩種方法常被交替使用。

對(duì)體積不同的柱子來(lái)說(shuō)，體積流速不能直接用作比較，一般都換算成線性流速，再做比較：

檢測(cè)裝柱效果一般用＜0.5%（~30μm介質(zhì)）或＜2%（~90μm介質(zhì)）柱體積的1%丙酮測(cè)試柱效和峰形。

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